Expression und Immobilisierung von Enzymen in Zellhüllen von Escherichia coli
Ilka Sührer, Dissertation Technische Universität München, 2015
Die Herstellung von Enzymen mit Immobilisierung in einem Prozessschritt könnte die Produktionskosten von Biokatalysatoren reduzieren. Hierzu wurden Enzyme nach Expression in der Zytoplasmamembran von E. coli verankert. Danach wurden die Zellen durch Expression von Lyseprotein E aus dem Phagen PhiX174 geöffnet, um Zellhüllen mit immobilisierten Enzymen im Rührkesselreaktor zu erhalten. Dabei konnten bis zu 27.000 Enzymmoleküle pro Zellhülle verankert und aktive Biokatalysatoren erhalten werden.
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Publikationen
- Sührer I, Langemann T, Lubitz W, Weuster-Botz D, Castiglione K (2015): A novel one-step expression and immobilization method for the production of biocatalytic preparations. Microbial Cell Factories 14: 180-189.
- Sührer I, Haslbeck M, Castiglione K (2014): Asymmetric synthesis of a Fluoxetin precursor with an artificial fusion protein of a ketoreductase and a formate dehydrogenase. Proc Biochem 49: 1527-1532.
- Hölsch K, Sührer I, Heusel M, Weuster-Botz D (2013): Engineering of formate dehydrogenase: Synergistic effect of mutations affecting cofactor specificity and chemical stability. Appl Microbiol Biotechnol 97: 2473-2481.